原理：活細胞中的線粒體脫氫酶能將 MTT（四唑鹽）還原成不溶性的藍紫色結(jié)晶甲臜，并沉積在細胞中，而死細胞無此功能。通過測定甲臜在特定波長下的吸光度，可反映細胞的活性和數(shù)量。

操作：將細胞接種到 96 孔板中，培養(yǎng)一段時間后加入 MTT 溶液，繼續(xù)孵育。然后去除上清液，加入二甲基亞砜（DMSO）溶解甲臜，用酶標(biāo)儀測定吸光度。

應(yīng)用：常用于細胞增殖、細胞毒性和藥物篩選等實驗。

原理：與 MTT 法類似，細胞內(nèi)的脫氫酶可以將 CCK - 8 試劑中的 WST - 8 還原成水溶性的橙黃色甲臜。活細胞數(shù)量與甲臜生成量成正比，通過檢測吸光度來衡量細胞活性。

操作：將細胞接種于培養(yǎng)板，加入 CCK - 8 溶液，孵育后直接用酶標(biāo)儀測定吸光度。

應(yīng)用：廣泛應(yīng)用于細胞活性檢測、細胞增殖分析、藥物篩選等領(lǐng)域。該方法操作簡便，靈敏度高，且無需裂解細胞。

原理：利用一些熒光染料對活細胞和死細胞進行特異性染色。例如，Calcein - AM 可被活細胞內(nèi)的酯酶水解，產(chǎn)生綠色熒光，而死細胞由于酯酶活性喪失，不能產(chǎn)生熒光；碘化丙啶（PI）只能進入死細胞，與 DNA 結(jié)合后發(fā)出紅色熒光。通過熒光顯微鏡或流式細胞儀可對細胞進行觀察和分析。

操作：將細胞與熒光染料孵育，然后用熒光顯微鏡觀察或流式細胞儀檢測。

應(yīng)用：可用于區(qū)分活細胞和死細胞，以及對細胞進行定量分析，常用于細胞凋亡、細胞周期等研究。

原理：ATP 是細胞內(nèi)的能量貨幣，活細胞中含有大量 ATP，而死細胞中的 ATP 會迅速降解。通過檢測細胞內(nèi) ATP 的含量，可反映細胞的活性。

操作：使用熒光素 - 熒光素酶試劑盒，該試劑盒中的熒光素在熒光素酶和 ATP 的作用下會發(fā)出熒光，熒光強度與 ATP 含量成正比。將細胞裂解后加入試劑盒試劑，用熒光檢測儀測定熒光強度。

應(yīng)用：常用于細胞活性檢測、細胞增殖分析以及藥物對細胞代謝的影響等研究。